ВЫДЕЛЕНИЕ, ОЧИСТКА И ИММУНОХИМИЧЕСКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА ВИРУСНЫХ ПРЕПАРАТОВ КАРТОФЕЛЯ
Main Article Content
Authors
С.З. Ескендирова
РГП «Национальный центр биотехнологии» КН МОН РК, г. Астана
Г.Б. Унышева
РГП «Национальный центр биотехнологии» КН МОН РК, г. Астана
Н.И. Сарина
РГП «Национальный центр биотехнологии» КН МОН РК, г. Астана
А.А. Какимжанова
РГП «Национальный центр биотехнологии» КН МОН РК, г. Астана
Г.К. Магзумова
РГП «Национальный центр биотехнологии» КН МОН РК, г. Астана
Abstract
Современная диагностика вирусных заболеваний является ключевым звеном в производстве здорового посадочного материала. В массовых масштабах ее используют для фитосанитарного мониторинга и фитосанитарной селекции, для сертификации посадочного материала и для карантинных целей. Кроме того, диагностика нужна для контроля оздоровления картофеля от вирусов и обеспечения селекционной и генно-инженерной работы по выведению новых сортов, устойчивых к вирусной инфекции [1-2].
Основная современная тенденция развития систем иммуноанализа – переход к неинструментальным методам. Хотя инструментальные методы анализа – ИФА и ПЦР – характеризуются высокой степенью точности, они трудоемки, сложны, занимают много времени, требуют высококвалифицированного персонала и дорогостоящего оборудования, что ограничивает их применение кругом хорошо оснащенных центров и лабораторий. Поэтому растет потребность в методически простых и доступных для широкого круга пользователей методах иммуноанализа, позволяющих проводить определение в малооборудованных лабораториях, в полевых и домашних условиях [3-5].
Появление в последние годы экспрессных форматов иммуноанализа, таких как иммунохроматография, иммуночипы и др., со временем анализа 10-20 мин существенно расширяет возможности применения иммунохимических подходов в сельскохозяйственной практике. Принципиальными достоинствами иммунохроматографии являются высокая скорость анализа, исчисляемая минутами, высокая чувствительность, простота подготовки образца и предельная простота выполнения самого анализа, не требующего никакого дополнительного оборудования или реагентов. Методическая простота, экспрессность (10-15 мин) и чувствительность иммунохроматографии обусловила ее активное применение для решения разнообразных диагностических задач [6-8].
С учетом необходимости контроля наиболее распространенных патогенов картофеля - вирусов PVY и PVХ для разработки иммунохроматографических тест- систем для экспрессной детекции требуется решение целого ряда методических приемов, связанных с выделением высокоочищенных препаратов вирусов, получением специфических моно-поликлональных антител и оптимизации параметров конструирования тест-полосок.
Keywords
вирус картофеля, картофель, детекция, микроклональное размножение
Article Details
References
Loebenstein G., Berger P.H., Brunt A.A., Lawson R.H. Virus and virus-like diseases of potato and production of seed potatoes // Kluwer Academic Publishers, Dortreich. – Boston, London, 2000. – 284 p. ISBN: 0792367294.
Анисимов Б.В., Белов Г.Л., Варицев Ю.А., Еланский С.Н. и др. Защита картофеля от болезней вредителей и сорняков. - М.: Картофелево, 2009. – 272 с.
Трофимец Л.Н., Варицев Ю.А., Князева В.П. и др. Разработка и применение метода иммуноферментного анализа для диагностики вирусных и бактериальных болезней картофеля // Научные труды НИИКХ. – М., 1986. – С. 33-40.
Бобкова А.Ф., Блинцов А.Н., Чирков С.Н. Пиротест - метод иммуноферментного анализа вирусов картофеля // Аграрная Россия. – 2003. – №3. – С. 23-27.
Дрыгин Ю.Ф., Чирков С.Н., Блинцов А.Н., Гаврюшина Е.С., Жержев А.В., Бызова Н.А., Дзантиев Б.Б., Атабеков И.Г. Высокочувствительные технологии молекулярной диагностики вирусных и вироидной инфекций картофеля // Картофелеводство России: актуальные проблемы науки и практики: матер. междунар. конгресса «Картофель. Россия – 2007». – М.: ФНГУ «Росинформагротех», 2007. – С. 17-25.
Блинцов А.Н., Дрыгин Ю.Ф., Григоренко В.Г., Андреева И.П., Осипов А.П., Атабеков И.Г. Инновационная технология экспресс-диагностики вирусных инфекций растений методом иммунохроматографии на тест-полосках // Картофелеводство: результаты исследований, инновации, практический опыт: матер. науч.-практ. конф. и координац. совещания «Научное обеспечение и инновационное развитие картофелеводства». – М., 2008. - Т. 1. – С. 290-297.
Бызова А.Н., Сафенкова И.В., Чирков С.Н., Жердев А.В., Блинцов А.Н., Дзантиев Б.Б., Атабеков И.Г. Разработка иммунохроматографических тест-систем для экспрессной детекции вирусов растений // Прикладная биохимия и микробиология. – 2009. – №2. – С. 225-231.
Drygin Yu.F., Blintsov A.N., Varitzev Yu.A., Uskov A.I., Kravchenko D.V., Atabekov I.G. Highly sensitive field test lateral flow immunodiagnostics of PVX infection // Applied Microbiology and Biotechnology. – 2012. – Vol. 93. - P. 179-189.
Усков А.И., Анисимов Б.В., Варицев Ю.А., Кравченко Д.В., Овэс Е.В., Дрыгин Ю.Ф., Блинцов А.Н., Осипов А.П., Григоренко В.Г., Андреева И.П., Атабеков И.Г. Новый метод экспресс-диагностики вирусов картофеля на иммунохроматографических тест-полосках / Россельхозакадемия, ВНИИКХ. – М., 2010. – 13 с.
Мэтьюз Р. Вирусы растений. – М.: Мир, 1973. – 520 с.
Мэйхи Б. Вирусология. Методы. – М.: Мир, 1988. – 389 с.
Virus Taxonomy: Report of the International committee on Taxonomy of Viruses // International Union of Microbiological Societies. Virology Division / ed. by A. King., M. Adams. - 2012.
Практикум по общей вирусологии / под ред. И.Г. Атабекова. – М.: МГУ, 2002. – 184 с. ISBN: 5-211-04529-7.
Hossain M., Bajet N.B. Isolation, Purification and patrial characterization of potato X potexvirus (PVX) the Philippines // Journal of tropical plant pathology. – 2001. – Vol. 37 (1). – P.16-27.
Watts N, Sing R.P. Discrimination Between Common and Necrotic Strains of Potato Virus Y by Denaturing Isoelectric Focusing // Phytopathology. – 1994. – Vol. 84. - P. 991-994.
Jamal S., Sabir M.. Identification of six potato virus Y isolates from Saudi Arabia // African Journal of Biotechnology. – 2012. - 22 May. – Vol. 11(41). - P. 9709-9715.